守護者
一、守護者（The Guardian）是第30號挑戰。以撒起始矇眼，擁有 出氣筒， 以撒的心臟， 聖盃和 命運之槍。你的目標是擊敗媽心或它還活着。以撒的心臟會跟隨 出氣筒而不是以撒。
二、難點
此挑戰主要的困難來源於出氣筒受任何形式攻擊都會使以撒受到傷害（因爲有 以撒的心臟），而且出氣筒的移動無法預測，嚴重阻礙了玩家避免替身受到傷害。這導致守護者挑戰成爲了這個遊戲最難的挑戰之一。
注意到出氣筒會受到傷害的而且沒有飛行能力，所以出氣筒並不能像 以撒的心臟一樣免疫地刺和水跡。沒有寶箱房和眼淚加大了難度，更爲困難的是，原本那些可以正常無傷應對的房間和首領現在可能會造成大量不可避免的傷害。例如，在沒有 聖經的情況下，紅色變種的媽腿幾乎無法清理因爲它會一直瞄準 出氣筒。
三、策略
1.玩家應當根據一個大致的優先級來擊殺敵人：會跑向你的敵人>會爆炸的敵人>有穿透射擊的敵人（即會發射 硫磺火光束的敵人）>會發射普通眼淚的敵人。記住以撒自身是無敵的，所以玩家可以用身體阻擋飛向 以撒的心臟的眼淚。
2.因爲以撒除了攻擊力外的其他屬性數據不會影響到 命運之槍，所以像是 夏娃的睫毛膏、 眼球突出、 獨眼巨人這類道具會直接增加命運之槍的攻擊力，像是、 奇怪的蘑菇 (小)這樣的道具會直接降低命運之槍的攻擊力。但是因爲 夜魔仍會受以撒的其他數據影響，所以上述道具會像影響以撒眼淚那樣影響 夜魔的眼淚。 吐根對挑戰很有幫助，因爲它會給命運之槍帶來極大的攻擊力提升以及中毒效果。
3.含有媽媽的手的房間幾乎是不可能清理的（因爲 出氣筒無法躲避媽媽的手），所以要儘可能跳過這些關卡。玩家可以使用炸彈炸門來跳過這些房間。
4.本挑戰中天使房要優於惡魔房，因爲天使房中有可能會提供像是 聖經、 聖餅、 生命的氣息這樣很有幫助的道具。
5.找到或買到 聖經可以讓挑戰簡單很多，可以讓以撒立刻殺死媽腿和媽心。
6.因爲在本挑戰中，紅色變種媽腿極難以一般流程戰勝，所以在沒有 聖經（或其充能未滿）的情況下，玩家需要大量的心或 聖餅或 混沌卡。
7.儘量少花時間在有地刺的房間內，因爲 出氣筒很有可能會走到上面。
8.環繞物在本挑戰中非常有效果，因爲它們可以造成很高的接觸傷害。像是有着每秒15次15.00傷害的 獻祭匕首是最好的傷害來源。血量也很重要，因爲它可以失誤造成的傷害，同樣速度可以使玩家在敵人靠近以撒的心臟前消滅它們。
9.捆綁包有助於本挑戰，因爲它可以讓紅心變爲兩倍。
10.玩家可以利用命運之槍的恐懼效果來迫使首領和小首領遠離 出氣筒。這一點對於像是雙子和色慾這樣會追逐 出氣筒的首領尤其有效。
11.在本挑戰中玩家是可以進入Boss Rush的。但是不推薦玩家嘗試，因爲如果沒有強力的道具組合，通關Boss Rush很困難。不過假如玩家有辦法逃出Boss Rush房（比如利用 0-愚者），盡力在20分鐘內擊敗媽媽還是很有益處的。
12.如果玩家不是很關注時間或分數而只是想解鎖道具，那麼 胎盤同樣是一個很好的道具因爲它可以讓你的生命再生。還有一個很慢很慢的方法是利用 神祕糖果隨機產生的便便，破壞便便有概率掉落半顆紅心或魂心。
13.生命的氣息對於挑戰極有幫助，因爲 以撒的心臟允許玩家按住空格永久無敵。雖然玩家仍然會在進入房間後充能條耗盡時受傷，但是這已經讓挑戰變得很簡單了（尤其是面對首領時），並且這也可以讓玩家無視地刺等有害障礙來探索房間。
14.值得注意的是，玩家可以在這場挑戰中獲得貓套裝，而且雖然在視覺上看不出來，但是玩家仍然可以產生藍蒼蠅。 命運之槍不能製造蒼蠅，但是像是 塔米貓的頭和 夜魔這樣可以產生眼淚的跟班和道具是可以製造蒼蠅的。
15.獲得 血之權利基本上就是贏得了這場挑戰，因爲玩家可以無代價地使用血之權利來快速消滅所有敵人（除了宿主和鱈魚蠕蟲）。但是由於本挑戰沒有寶箱房，所以獲取 血之權利的唯一途徑就是暗門或房間中自然生成。
16.第二個玩家的加入會讓挑戰更加簡單。多人模式寶寶有它自己的 命運之槍並且沒有矇眼可以發射眼淚，而且多人模式寶寶因爲 以撒的心臟所以不會受到傷害。
17.獲得 祭典之刃可以使玩家在不受到傷害的情況下產生黑色血激光環，這讓清理房間變得更加簡單並且玩家獲得更多黑心。
18.獲得 病毒可以使玩家在不受到傷害的情況下讓敵人中毒並且在殺死中毒的敵人後有概率掉落黑心。因爲行走宿主、鱈魚蠕蟲這類的敵人可以不受 命運之槍的傷害並且對 出氣筒造成接觸傷害，所以 病毒和其他毒性效果對於這類敵人效果很好。
19.像是 小硫磺火、 聖髑、 黑暗乞丐、 小查德、 夜魔以及 魅魔（尤其是有 永遠的好朋友！時）這樣的跟班會讓挑戰更加簡單。
20.變小藥丸會讓挑戰變難，因爲判定體積變小會使玩家更難阻擋瞄準 出氣筒的攻擊
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